🧬 Regulatory T Cell (Treg) — 핵심 가이드
Regulatory T cell(Treg)은 면역 항상성을 유지하고 과도한 면역반응을 억제하는 CD4⁺ T cell 아형입니다.
대표적으로 FOXP3, CD25(high), CD127(low/–), CTLA-4 등의 마커를 활용하여 정의·분석하며, 연구자는 이를 통해 자가면역, 종양미세환경, 이식 연구 등 다양한 분야에서 활용할 수 있습니다.
핵심 포인트
- 주요 마커: FOXP3, CD25(high), CD127(low), CTLA-4
- 게이팅 전략: Live/Single → CD3⁺CD4⁺ → CD25(high)CD127(low) → FOXP3(세포내)
- 응용 분야: 자가면역 질환, 종양 미세환경(TME), 이식 연구, 염증성 질환
🔍 Treg의 정의와 분류
- nTreg (natural Treg): 흉선에서 기원, FOXP3 안정 발현
- iTreg (induced Treg): 말초에서 TGF-β + IL-2 자극으로 유도, 환경에 따라 가역성 발생 가능
📊 Treg 마커 & 패널 설계
권장 마커
- 필수: CD3, CD4, CD25(high), CD127(low/–), FOXP3
- 선택: CTLA-4, Helios, GITR, TIGIT
예시 패널 (8–10 color)
- CD3, CD4, CD25, CD127, FOXP3, CTLA-4, Live/Dead, Dump channel(CD8/CD14/CD19)
👉 형광체 선택 시 스펙트럼 중첩 최소화 필수 → Novus Spectra Viewer 활용 추천
👉 FACS antibody를 이용한 stain 방법 확인하기 ->
🧪 R&D Systems의 Treg 항체는 다릅니다!
✅ 특징 | 내용 |
다중 형광 형식 | Unconjugated / APC / PE / Alexa Fluor 488 등 다양한 선택 가능 |
사람 & 마우스용 모두 보유 | Cross-species 연구에 적합 |
검증된 항체 | Flow cytometry, IHC, ELISA 등 다중 실험에서 검증 |
높은 로트간 일관성 | Quantikine 품질 기준 적용 |
🧪 기능과 응용 분야
- 면역 억제 기전: CTLA-4 매개 APC 조절, IL-10/TGF-β 분비, IL-2 경쟁 소비
- 응용 사례:
- 자가면역 질환 (RA, MS, IBD)
- 종양 미세환경(TME) 연구
- 장기 이식/관용 유도
- 염증 해소 및 조직 항상성
🔬 분리·유도·확장 프로토콜
분리(Isolation)
- CD4⁺CD25⁺ 분리(자석/Flow sort) 후 CD127(low) 기준으로 정제
- FOXP3 확인으로 effector T cell 혼입 방지
유도·확장(Induction/Expansion)
- iTreg 유도: TGF-β + IL-2, 항-CD3/28 자극
- 확장: 저용량 IL-2 유지, Rapamycin 보조 → FOXP3 안정성 향상
- 품질 확인: FOXP3 발현 지속, Suppression assay로 기능 검증
🎨 형광 선택 & 스펙트럼 팁
- 저발현 마커(FOXP3, CTLA-4) → 밝은 형광체 할당
- 고발현 마커(CD3, CD4) → 중간 밝기 형광체
- 반드시 FMO + single-stain compensation 포함
📦 제품 리스트
Molecule | Species | Unconjugated | APC | Fluorescein | PE | PerCP | Alexa Fluor 350 | Alexa Fluor 405 | Alexa Fluor 488 | Alexa Fluor 594 | Alexa Fluor 647 | Alexa Fluor 700 | Alexa Fluor 750 |
CD3 | Human | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● |
CD3 | Mouse | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● |
CD4 | Human | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● |
CD4 | Mouse | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● |
FoxP3 | Human | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● |
FoxP3 | Mouse | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● |
CD25 | Human | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● |
CD25 | Mouse | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● |
CD39 | Human | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● |
CD39 | Mouse | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● |
CD73 | Human | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● |
CD73 | Mouse | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● |
Neuropilin-1 | Human | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● |
Neuropilin-1 | Mouse | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● |
CTLA-4 | Human | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● |
CTLA-4 | Mouse | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● | ● |
❓ 자주 묻는 질문 (FAQ)
Q1. Treg 분석에서 가장 신뢰할 수 있는 마커 조합은 무엇인가요?
➡️ CD25(high) + CD127(low/–) + FOXP3(세포내)의 3중 조합이 가장 널리 사용됩니다.
Q2. nTreg와 iTreg는 어떻게 구분하나요?
➡️ nTreg는 흉선 유래로 FOXP3 안정성이 높고, iTreg는 TGF-β + IL-2 자극으로 유도되며 Helios, Neuropilin-1 등이 보조 지표로 사용될 수 있습니다.
Q3. FACS 항체 선택 시 어떤 점을 고려해야 하나요?
➡️ 형광체 스펙트럼 중첩(Compensation), 항체 클론의 특이성, 타이터(Titration), 장비 레이저/필터 호환성을 확인해야 합니다.
Q4. Host 종별 항체 선택은 어떻게 하나요?
➡️ 연구 대상에 맞춰 human, mouse, rat 등 종 특이성이 맞는 항체를 선택해야 하며, 웅비메디텍은 다양한 종에 대응하는 항체를 판매합니다.
Q5. 여러 형광체를 동시에 사용할 때 최적화 방법은?
➡️ 밝기·스펙트럼 분산을 고려해 형광체를 배치하고, Spectra Viewer로 최종 검증 후 실험 시 FMO 및 single-stain 컨트롤을 반드시 포함합니다.
📞 문의 및 정보
- 웅비메디텍
- 전화: 02-881-5432
- 웹사이트: www.woongbee.com
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